【摘要】 
       目的分析近11年来中医药治疗大肠癌的实验研究方法和实验内容。方法采用文献源分析方法，对近11年来发表在国内医药期刊上中医药治疗大肠癌的文献质量、实验方法、实验内容等情况进行回顾分析。结果85篇文献纳入分析，其中27篇为随机对照研究。体内动物实验29篇(34.12%)，单味药治疗共有54篇（63.53%），研究肿瘤细胞的凋亡有28篇（32.94%）。结论中医药治疗大肠癌的实验研究主要集中在单味药，体外实验以及肿瘤细胞的凋亡方面。研究的设计和质量还需进一步提高。
       【关键词】  大肠癌； 文献源分析； 中医药疗法； 实验研究
        大肠癌是常见的恶性肿瘤之一，在美国仅次于女性乳腺癌和男性肺癌为第3位常见恶性肿瘤，死亡率占第2位，每年新发病例约145 000例，死亡56 000例［1］。近年来，我国大肠癌的发病率和死亡率也逐年上升，2000年资料显示我国大肠癌死亡率在女性占第4位，男性占第5位，在城市中已成为第3位的常见恶性肿瘤［2,3］。中医药以其独特的优势在大肠癌的治疗中发挥了不可替代的作用。近年来随着分子生物学、生物化学、病理、基因技术的飞速发展，中药治疗大肠癌的实验研究方法也取得了较大的发展，为中医药抗癌提供了科学实证，也为大肠癌的治疗开拓了更为广阔的思路。现将近十年中医药治疗大肠癌的实验研究文献总结如下。
       1  研究方法
       1.1  纳入标准选择1997～2007年间国内医药期刊杂志上公开发表的中医药或中西医结合治疗大肠癌的实验研究文献。
       1.2  排除标准①非实验研究文献；②实验文献，但对实验方法、过程等描述不清的文章。
       1.3  剔除标准重复的文献、不能查到原文的文献、没有具体说明实验方法的文献。
       1.4  文献检索的方法以中国生物医学文献光盘数据库（CBMdisc）、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库为主要检索工具，进行摘要和全文检索，并配合手工检索。检索词为大肠癌、结肠直肠肿瘤、中医治疗、中药治疗、中西医结合治疗、实验研究等。
       1.5  统计方法先阅读摘要，筛选出合适的文章，再阅读全文，摘出数据。然后对数据进行分类统计，并反应相应的构成比。
       2  结果
       2.1  文献查询结果共检索到符合要求的文献93篇，剔除不能查到原文的5篇和内容重复的3篇，纳入分析的文献共85篇。根据发表的年限分类，1997年发表2篇（2.35%），1998年3篇（3.52%），1999年4篇（4.71%），2000年12篇（14.12%），2001年1篇（1.18%），2002年3篇（3.52%），2003年8篇（9.41%），2004年13篇（15.29%），2005年16篇（18.82%），2006年9篇（10.59%），2007年14篇（16.47%），见图1。
        93篇文献分别发表在62本杂志上，其中《中国中西医结合消化杂志》《中国中医基础医学杂志》《癌症》《中华消化杂志》《世界华人消化杂志》发表了3篇或以上文献。
       2.2  文献分析方法与结果
       2.2.1  研究设计
        分组对照：85篇文献中计有47篇（55.29％）采用了对照研究，其中28篇文献注明为随机对照研究，有两篇注明了随机方法，包括统计表法、随机数字表法各1篇，其余38篇(44.71％)为非对照研究。
       
       对照设定：在47篇对照研究中，20篇（42.55％）文献采用不同中药剂量组与生理盐水和/或化疗药进行对照；14篇（29.79％）文献采用单个剂量的中药组与生理盐水和/或化疗药进行对照；其余13篇（27.66％）文献采用了其他多种对照分组。
       
       统计方法：38篇非对照文献采用了描述性统计。47篇对照文献中仅10篇（11.76%）既有假设检验又有检验方法，而24篇(51.06%)仅描述统计结果，无假设检验；13篇(27.66%)有假设检验，但无检验方法说明。
       2.2.2  治疗药物和方法
        单味药治疗：共有54篇（63.53%）。根据单味药的种类分类，植物药47篇(87.04%)，矿物药4篇(7.41%)，动物药3篇(5.56%)；根据药物作用成分分类，单味中药有效成分提取物的研究50篇(92.59%)，直接单味药煎剂抗肿瘤研究4篇(7.41%)。
       
       复方治疗：共25篇（29.41%），其中经方2篇（8%），验方23篇（92%）。采用中药复方煎剂19篇(76%)，复方药物提取的注射液2篇(8%)，复方制成的口服成药（丸剂3篇、膏剂1篇）4篇 (16%)。
       
       其它治疗方法：共6篇。其中采用联合治疗的有6篇（7.06%），中药联合有6篇（7.06％）文献采用了包括针灸在内的其他治疗方法。
       2.2.3  实验方法
        肿瘤细胞株：选用的肿瘤细胞株共有24种，其中HT-29细胞株22篇（25.88%），LoVo细胞株14篇（16.47%），SW1116细胞株 9篇(10.59%)，SW480细胞株7篇(8.24%)，CaCo-2细胞株3篇(3.53%)，SW620细胞株3篇(3.53%)，Ls-174细胞株2篇(2.35%)，Co26lu细胞株2篇(2.35%)，HCT细胞株2篇(2.35%)，取自临床手术标本2篇(2.35%)，其余的14种细胞株均只有1篇文献选用。
       
       体外实验：85篇文献中采用动物体外实验共计56篇(65.88%)。药物作用于培养的细胞51篇（91.07%），其中1篇先体内采用裸鼠皮下成瘤造模，再体外观察药物对培养的细胞的作用。先制备药物血清然后作用于培养的细胞5篇(8.93%)。
       
       体内实验：采用动物体内实验的文献29篇(34.12%)。选用了3种动物，其中裸鼠17篇（58.62%），大鼠6篇（20.69%），小鼠6篇（20.69%）。动物造模方法采用皮下成瘤的有13篇（44.83%），二甲肼诱发成瘤10篇（34.48%），接种于肾包膜下2篇（6.90%），原位接种于盲肠2篇（6.90%），皮下注射动物右大腿1篇，植入脾脏1篇（3.45%）。
       2.2.4  实验内容
        研究方向：85篇文献分别从一个或多个方面进行了研究，主要的研究方向包括：肿瘤与细胞凋亡28篇（32.94%），抑制瘤细胞增殖23篇（27.06%），人类基因组与肿瘤15篇（17.65%），肿瘤转移分子生物学11篇（12.94%），肿瘤与免疫6篇（7.06%），预防研究6篇（7.06%），细胞周期与肿瘤发生发展6篇（7.06%），肿瘤的血管生成及抗血管生成的肿瘤生物治疗5篇（5.88%），肿瘤与信号传导2篇（2.35%），对瘤细胞内钙离子的研究2篇（2.35%），瘤细胞分化的研究1篇（1.18%）。
       
       检测指标：85篇文献共检测了53项指标。其中较多见的检测指标中Bcl-2有6篇，Bax、P53mRNA各4篇，COX-2 mRNA、P21、Ki-67、VEGF、VEGF-R、MVD、MAD、ACF、细胞内钙离子浓度各3篇，详见表1。表1  85篇文献中使用的53项检测指标（略）
       检测方法：选用的检测方法有56种：抗癌药物敏感试验（MTT法）36篇（42.35%），流式细胞仪31篇（36.47%）；免疫组化16篇（18.82%）；RT-PCR 10篇（11.76%）；病理组织检查8篇（9.41%）；图像分析系统定量检测7篇(8.24%)；琼脂糖凝胶电泳5篇(5.88%)；Western blot5篇(5.88%)；绘制生长曲线4篇(4.71%)；透射电镜4篇(4.71%)；荧光显微镜3篇(3.53%)；集落形成抑制实验3篇(3.53%)；荧光染色法3篇(3.53%)；ELISA法3(3.53%)篇。其它42种检测方法只有1篇或2篇文献选用。
       3  讨论
        虽然治疗大肠癌不断有新药和新的化疗方案出现，但治疗效果尚不尽如人意，10年生存率也仅50％左右［4］。中医药治疗肿瘤已在临床广泛应用，并普遍认同其具有减毒增效的作用。实验研究作为基础研究，为临床应用提供了实验依据，还可为新药研发提供方向，具有重要的作用。中医药治疗大肠癌的实验研究也日益受到重视，通过此次分析也可以看到发表的文献数量也在逐渐增加。
       
       通过这次文献学分析可以看到中医药治疗大肠癌的试验研究具有以下特点：①治疗方法中药物治疗占绝对主导地位，少量文献涉及到针灸治疗。治疗药物以单味药研究为主，占了文献总量约三分之二，其中植物药的有效成分研究普遍受到关注。复方研究主要集中在经验方的研究，很少涉及经方研究，这也与临床治疗实际相符合；②实验方法以体外实验为主，占了约三分之二的文献量。体内实验主要采用瘤种接种，尤其是肿瘤的皮下接种。原位移植瘤的方法也使用较少，这可能与原位肿瘤接种后较易形成肠梗阻导致动物死亡，从而影响观察结果有关。使用的肿瘤细胞株较广，但仍以HT-29为主；③研究方向以肿瘤细胞的凋亡/肿瘤生长增殖抑制为主要研究热点，与之相关的指标如Bcl-2、Bax、P53、COX-2 mRNA、P21、Ki-67、VEGF、MVD等也成为主要检测的指标。
       
       同时，通过本次文献学分析也发现一些研究设计方面的问题，仅刚过半数的文献采用了对照研究，而随机对照的研究不到三分之一，设计严格的随机对照研究则更少。研究的设计决定了研究的可信程度，随机对照研究可以很大程度上可以减少偏倚的产生，动物实验较临床试验更容易施行随机对照研究，但仅少部分研究采用随机对照研究应该引起研究者的重视。
       
       中医药治疗大肠癌的实验研究已取得了一定的进步，研究涉及到了基因、免疫等多个方面，研究的手段也越来越先进，许多研究已经达到了分子水平，但是从以上分析不难看出还存在着一些的问题，这些问题如不能及时有效解决，可能会影响到研究的质量和最终结果的获得，因此亟需研究人员引起重视。同时随着相关理论和基础学科的不断发展，这些研究成果如细胞形态定量分析、DNA含量测定和蛋白组学等也应尽快引入中医药治疗大肠癌的研究中，实现以中医药为根本，努力寻找和筛选更为有效的中药制剂。
       【参考文献】
         1］Jemal A, Murray T, Ward E, et al. Cancer statistics［J］.CA Cancer J Clin，2005，55(1):10.
       
       ［2］董志伟.肿瘤防治任重道远［J］.中国肿瘤，2002，11（1）：2.
       
       ［3］董志伟，乔友林，李连第，等.中国癌症控制策略研究报告［J］.中国肿瘤，2002，11(5)：250.
       
       ［4］郑 树.我国大肠癌防治研究的挑战和机遇［J］.浙江大学学报（医学版） ，2004，33（5）：375.