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介绍

     针刺治疗脑缺血已被证实是一种有效的治疗手段。已有研究表明针刺对促进脑血流量具有治疗作用，预防神经细胞凋亡，改善神经行为表现和调控蛋白质和基因表达。根据中医针灸理论，内关穴(PC6)是手厥阴心包经络的穴位，心包经络是心脏支配全身血液循环的主要血管。因此，针刺内关穴具有调节大脑血液循环的作用。现代研究也表明，针刺内关穴对缺血性中风的治疗具有特异性的治疗作用。根据循证研究发现，内关穴是治疗缺血性中风最常用的十个穴位之一。

     在实验室和临床研究中，针灸手法与其他因素相比，如取穴或针灸方法的选择，一直被忽视。在这些研究中，不同的针刺操作人员对针刺手法的差异使得针刺操作难以达到统一的标准。作为一种物理刺激，针灸创造了一个特定的刺激水平，而针灸手法是调节刺激量的方法。针刺手法是一个广泛的概念，包括时间、频率、角度、深度等方面。持续时间是针刺操作时间，是调节针刺手法最常用的因素之一，因此本研究选取持续时间作为代表性因素，探讨针刺手法对针刺疗效的影响。在以往的研究中，针刺内关推举法治疗脑缺血显示出积极的治疗效果，不同的持续时间和频率参数在治疗效果上存在差异。进一步证明针灸操作针灸效应的意义,本研究采用了twisting-rotating方法治疗大鼠大脑中动脉闭塞模型通过针刺Neiguan穴位,在更广泛的尝试确定针刺的最好时间Neiguan治疗缺血性中风。

 

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材料和方法

动物：雄性，无特定病原体的Wistar大鼠，3个月龄，体重250-300g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供。

分组：将126只大鼠随机平均分为7组:对照组、假手术组、模型组、非针刺组和针刺时间分别为5、60、180秒。

建立大脑中动脉闭塞模型：采用改良的Zea-longa线程连接方法复制大脑中动脉闭塞模型。

针灸干预：在5,60和180秒的针灸组中，右侧的内关穴在相同的扭转频率（3Hz）下针刺不同的持续时间，即5,60 和180秒。在正常，假和非针灸组，大鼠没有接受任何针灸干预，但在实验期间也用针灸组处理了六次。在麻醉恢复意识后（通常在大脑中动脉闭塞手术后3-5小时）对大鼠进行第一次针刺，并在随后的72小时内再接受5次针刺治疗。在模型组中，大鼠没有接受任何针灸干预。该组大鼠一旦从麻醉中恢复，就进行神经行为测试和脑血流检测。然后将它们断头以允许测量脑梗塞体积。在模型组中建模后立即进行观察，并且在非针刺组建模后72小时进行观察。

评估神经功能：在从麻醉中恢复的大脑中动脉闭塞大鼠后，根据Zausinger的6点法评估神经功能缺陷。

检测脑血流量：在建模后72小时，在模型组的所有组中进行脑血流检测

通过2,3,5-三苯基四唑氯化物（TTC）染色测量脑梗塞体积。

统计分析

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结论

一、不同针刺时间对脑中动脉闭塞大鼠神经功能的影响

与正常组和假手术组相比，模型组神经功能缺损评分显著降低(P < 0.05)。模型组大鼠神经功能缺损评分5秒针刺组、180秒针刺组与非针刺组比较差异无统计学意义(P > 0.05)。与非针刺组相比，针刺60秒组大鼠神经功能缺损评分明显升高(P < 0.05)。与5秒针刺组和180秒针刺组相比，60秒针刺组大鼠神经功能缺损评分也有显著提高(P < 0.05)。针刺5秒组和180秒组大鼠神经功能缺损评分差异无统计学意义(P > 0.05;图1)。

 

（图1：不同针刺时间对大脑中动脉闭塞大鼠神经功能缺损评分的影响。

结果表示为每组18只大鼠的平均值±SD。使用单因素方差分析来比较组间的差异，并使用最小显着性差异检验来比较两组之间的差异。* P <0.05，vs。正常组; ＃P <0.05，VS。模型组; † P <0.05，vs。非针灸组; § P <0.05，VS。60秒针灸组。我：正常组; 二：假组; 三：模型组; 四：非针灸组; V：5秒针灸组; 六：60秒针灸组; 七：180秒针灸组。）

二、不同针刺时间对大脑中动脉闭塞大鼠脑血流量的影响

与正常组和假手术组相比，模型组脑血流量明显减少（P <0.05）。模型组和非针刺组大鼠脑血流量相似（P > 0.05）。与模型组比较，三个针刺组大鼠脑血流量均显着增加（P <0.05）。与5秒针刺组和180秒针刺组相比，60秒针刺组大鼠脑血流量也显着增加（P <0.05）。5秒针刺组和180秒针刺组大鼠脑血流量无显着性差异（P > 0.05; 图2））。

 

（图2：结果表示为每组18只大鼠的平均值±SD。使用单因素方差分析来比较组间的差异，并使用最小显着性差异检验来比较两组之间的差异。* P <0.05，vs。正常组; ＃P <0.05，VS。模型组; † P <0.05，vs。非针灸组; § P <0.05，VS。60秒针灸组。一：正常组; 二：假组; 三：模型组; 四：非针灸组; V：5秒针灸组; 六：60秒针灸组; 七：180秒针灸组。）

三：不同针刺时间对大脑中动脉闭塞大鼠脑梗死体积的影响

模型组脑梗死明显（P <0.05），三个针刺组梗死体积均减少（P <0.05），正常组和假手术组均未见梗死。模型组，非针刺组，5秒针刺组和180秒针刺组大鼠脑梗死体积相似（P > 0.05）。与非针刺组相比，60秒针刺组大鼠脑梗死体积明显减少（P <0.05）。与5秒针刺组和180秒针刺组相比，60秒针刺组大鼠脑梗死体积也明显减少（P<0.05）。5秒针刺组和180秒针刺组大鼠脑梗死体积无显着性差异（P > 0.05; 图3）。

 

（图3：（A）2,3,5-三苯基四唑氯化物染色后大脑中动脉闭塞大鼠的脑梗塞体积。白色区域是梗塞区域，红色是正常组织。（B）大脑中动脉闭塞大鼠的脑梗塞体积比。结果表示为每组18只大鼠的平均值±SD。使用单因素方差分析来比较组间的差异，并使用最小显着性差异检验来比较两组之间的差异。* P<0.05，vs。正常组; ＃P <0.05，VS。模型组; † P <0.05，vs。非针灸组; § P <0.05，VS。60秒针灸组。我：正常组; 二：假组; 三：模型组; 四：非针灸组; V：5秒针灸组; 六：60秒针灸组; 七：180秒针灸组。）

综上所述，针刺是治疗缺血性脑卒中的有效疗法，手法是影响针刺效果的重要因素。在本研究中，60秒是固定频率下针刺内关穴治疗缺血性脑卒中的最佳时间-3赫兹。然而，针刺手法是一个相当宽泛的术语，不仅指针刺的持续时间，还包括针刺的频率、幅度和角度。在本研究中，重点放在针刺时间。针刺治疗效果是否受其他因素影响还有待进一步探索。在我们的研究中，针刺的治疗效果在72小时内观察到，但针刺对脑缺血后期进展的影响尚不清楚。针刺手法如何影响针刺治疗效果的机制尚不清楚，但正是这些针刺手法的潜在生物学机制将为正在进行的针刺治疗缺血性中风疗效研究奠定基础。

文章来源：

Neural Regen Res. 2015 Jan; 10(1): 159–164. doi: 10.4103/1673-5374.150727